In vitro initiation and early maturation of embryogenic tissue of Quillaja saponaria.

A. Vega, D. Prehn

Abstract


Quillay (Quillaja saponaria) is an endemic tree that grows between IV and IX Region of Chile. The factors that affect the generation of somatic embryos were determined with the objective to study their clonal propagation. Hypocotyls of seeds and apexes of selected adult trees were used for the in vitro culture. The embryogenic induction was performed in 0.5xMS medium supplemented with 13.5 µM 2,4-D and 4.4 µM BAP, during 8 weeks. Later, the embryogenic masses accumulated reserves in medium with 15 mg·L-1 of ABA during 4 weeks. The addition of 4.4 µM BAP to the medium promoted the maturation of pro-embryos to embryos in globular state (Phase Maturation I). In addition, we determined that supplements of casein hidrolysate, magnesium sulphate and glutamine favored the development of the somatic embryos. However, the decrease in the concentration in the gelling agent and the variation in the concentration of oxidized and reduced sources of nitrogen did not significantly affect the maturation. These effects allow developing somatic embryos until globular state, from young and adult tissue of Q. saponaria.

 

El quillay es un árbol endémico chileno que crece entre las regiones IV y IX. Con el objetivo de mejorar su propagación clonal se determinaron los factores que afectan la generación de embriones somáticos. Para el cultivo in vitro se utilizaron hipocotilos de semillas y ápices de árboles adultos seleccionados de tres genotipos. La inducción embriogénica de los explantes se realizó en medio 0,5 x MS complementado con 13,5 µM de 2,4-D y 4,4 µM de BAP, durante 8 semanas. Posteriormente, los callos embriogénicos acumularon reservas al adicionar al medio 15 mg·L-1 de ABA durante 4 semanas. La remoción del 2,4-D y la mantención de la concentración de 4,4 µM de BAP en el medio de cultivo promovió la maduración de pro-embriones a embriones en estado globular (Fase de Maduración I). Además, se determinó que los suplementos de hidrolizado de caseína, sulfato de magnesio y glutamina beneficiaron el desarrollo de los embriones somáticos. En cambio, la disminución en la concentración en el gelificante y la variación en la concentración de fuentes oxidadas y reducidas de nitrógeno no afectaron significativamente la maduración. Los efectos estudiados permiten desarrollar embriones somáticos hasta estado globular tanto de tejido juvenil como de tejido adulto de Quillaja saponaria de tres genotipos.


Keywords


Saponins, somatic embryogenesis, Embriogénesis somática, Quillaja saponaria, saponinas.

Full Text:

Untitled


DOI: http://dx.doi.org/10.7764/rcia.v32i3.320